Значение дополнительного надзора за полиовирусом для программы ликвидации полиомиелита

18.10.2007

Надзор за полиовирусом с помощью исследования сточных вод логически обоснован благодаря свойствам вируса и эпидемиологическим особенностям инфекционного процесса и может быть очень полезным для программы ликвидации полиомиелита. Все лица, инфицированные полиовиру-сом, независимо от того, проявляют ли они симптомы заболевания полиомиелитом, менингитом или инфекционный процесс протекает бессимптомно, выделяют вирус с фекалиями в течение нескольких недель. По данным Дж. П. Александера и соавт., продолжительность экскреции дикого полиови-руса невакцинированными детьми составляла 3 - 4 недели [11]. Дети, получившие полный курс иммунизации ОПВ, с высоким уровнем гуморального иммунитета могут выделять вакцинно-родствен-ный вирус до 3-х месяцев [47]. Лица с различными формами первичных иммунодефицитов могут быть длительными (до нескольких лет) экскреторами полиовируса [29]. Концентрация вируса в фекалиях достигает 105 ТЦД50 в грамме фекалий в течение первых двух недель после инфицирования, затем уменьшается и может впоследствии значительно варьировать, но она достаточна для детекции вируса [40]. Полиовирус устойчив во внешней среде и может сохраняться в сточных водах от 42 дней при температуре 18 - 25 оС до 231 дня при 4 - 8 оС [35, 32]. Обследование фекально-бытовых сточных вод учреждения - района - поселка - города, представляющих собой «объединенный фекальный образец», дает информацию о циркуляции вирусов в целевой группе или достаточно большой популяции [44]. Количество проб сточных вод может быть небольшим, в то время как для получения такой информации с помощью обследования проб фекалий необходимо было бы исследовать значительное количество образцов. Эксперимент с искусственным внесением вакцинного вируса полиомиелита типа 1 в сточные воды показал, что исследование одного образца сточной воды объемом 400 мл позволяет установить циркуляциюполиовируса среди группы населения в 700 тыс. человек, если один человек из 10 тыс. выделяет полиовирус [28]. В отличие от эпидемиологического надзора, требующего длительного организационного подготовительного периода, надзор за сточными водами может быть организован достаточно быстро [18, 20], что особенно важно в экстремальной ситуации (так, после выявления дикого вируса полиомиелита в Грузии в 2001 году, в этой стране был налажен и успешно функционирует надзор за сточными водами) или в тех случаях, когда надзор за ОВП не дает информации о циркулирующих полиовирусах, что возможно в странах с небольшим расчетным числом случаев ОВП [10].

Эффективность надзора за полиовирусом с помощью исследования сточных вод и надежность получаемых данных в значительной степени зависят от технических аспектов [24]. К ним в первую очередь можно отнести выбор места и кратность отбора проб, способ отбора и концентрирования, детекцию и идентификацию выделенных вирусов. При целенаправленно организованном надзоре места, выбранные для регулярного отбора проб, должны быть эпидемиологически значимыми, например представлять определенную группу населения, отличающуюся повышенным риском инфицирования полиовирусом. Следует учитывать, что обнаружение вируса наиболее вероятно в неочищенных сточных водах, не содержащих индустриальных примесей. Более частый отбор проб повышает эффективность исследования. Математическое моделирование показало, что исследование образца сточных вод объемом 1 литр из коллектора, принимающего стоки от 1 млн человек, который отбирают на одном и том же месте дважды в месяц, может выявлять циркуляцию дикого полиовируса быстрее, чем хорошо налаженный надзор за ОВП [42]. Однако увеличение количества исследуемых образцов повышает нагрузку на лабораторию, выполняющую исследования, и делает их более дорогостоящими. Эффективность исследования может быть повышена за счет увеличения количества параллельных клеточных культур [26, 54], на которых исследуют образец воды, но при этом также возрастают стоимость исследования и объем лабораторной нагрузки. Компромисс между этими двумя приемами для повышения эффективности исследований может найти каждая лаборатория, исходя из своих возможностей. Существует два принципиальных способа отбора проб сточных вод [7, 24]. Первый - одномоментный «захват», при котором однократно отбирают определенный объем воды. При использовании сложного оборудования объем пробы может достигать 400 литров и более [56]. Исследование больших объемов воды повышает эффективность надзора, однако это трудно в практическом отношении, поэтому рекомендованный экспертами ВОЗ объем пробы - 1 литр [7]. Преимущество данного способа заключается в возможности проводить количественные расчеты, например определять концентрацию вируса в образце воды. Второй способ действует по типу «ловушки» - в ток сточных вод на определенное время помещают адсорбирующий материал, например марлевый тампон [43] или пакет с адсорбентом [5]. Длительное время экспозиции такой «ловушки» в токе сточных вод (от 3-х до 7-ми дней) повышает информативность исследования, однако свойство сорбента связывать вирус может быть блокировано твердыми взвешенными частицами, присутствующими в сточных водах. В долговременных проектах по надзору за дикими полиовирусами оба метода отбора продемонстрировали эффективность, поэтому выбор метода в конечном итоге определяется возможностями исследователей [24]. Существует несколько различных методов концентрирования одномоментно отобранных образцов воды [34, 35]; для элюции вирусных частиц с сорбента могут быть использованы различные элюаты [9]. В любом случае лаборатория, выполняющая такие исследования, должна провести внутреннюю аттестацию используемого метода [7]. Метод, позволяющий обнаружить 10 - 20 ТЦИД50 полиовируса в 500 мл пробы сточной воды, считается эффективным.