Лабораторная характеристика ослабленных вариантов отечественных штаммов вируса краснухи, адаптированных к культуре клеток Vero

10.08.2008
Вирионы вируса краснухи, штамм С-77, 48-й пассаж, в культуре клеток Vero (а - масштабная линейка соответствует 100 нм, б - 50 нм)

Рисунок 1. Вирионы вируса краснухи, штамм С-77, 48-й пассаж, в культуре клеток Vero (а - масштабная линейка соответствует 100 нм, б - 50 нм)

Более высокие уровни антител выявлены при внутривенной иммунизации. Отмечено, что большей антигенной активностью обладал штамм С-77. Определено влияние длительности пассирования на иммунологическую активность штаммов. В опытах со штаммом С-77, взятым на 5-м и 21-м пассажах при внутривенной иммунизации, титры антител достигали максимального уровня через 8 недель и составляли 8192 и 277,3 соответственно. При интраназальном введении антитела в максимальных титрах (234,7 и 184) определялись через 4 и 8 недель.

Штамм С-74 характеризовался меньшей антигенной активностью. Этот вирус, испытанный на 7-м пассаже, вызывал образование антител, которые при иммунизации внутривенно достигали титра 149,3, а при интраназальном введении - 74,6. Вирус 30-го пассажа индуцировал образование антител в титре 53,3 только при внутривенном введении.

Но в опытах с этим штаммом, испытанным на 43-м пассаже, при внутривенном введении титры антител оказались выше и отмечен, хотя и невысокий, иммунологический ответ при интраназальном введении.

Низкие показатели уровней антител получены с вариантами обоих штаммов, которые дополнительно были культивированы в 10 - 14-ти и 10 - 16-ти пассажах при 33 оС. Штамм С-77, взятый на 44-м и 48-м пассажах, при внутривенном введении индуцировал антитела в средних, а при интраназальном методе - в низких титрах, выявленных через 2 недели после иммунизации.

Вирус, пассаж Иммунизир. доза Метод введения Антитела к вирусу краснухи*
БОЕ/мл ГЕ/мл сроки определения (нед)
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12
С-77 5 пас. 2,1x10* 40 в/в** <8   597,3 597,3 853,3 1024,0 2048,0 6144,0 8192,0 7509,3 4437,3 4906,6
и/н*** <8   192 117,3 234,7 149,3 234,7 80,0 160,0 144,0 272,0 264,0
С-77 21 пас. 8,0x10s 160 в/в <8   234,6 298,6 192,0 192,0 192,0 192,0 277,3 149,3 77,0  
и/н <8   <8 10,7 21,3 37,3 98,7 101,3 184,0 101,3 58,7  
77 32 пас. 2,2x10s 40 в/в <4   96   170,6   426,6 426,6        
и/н <4   16   88   66,6 69,3        
С-77 44 пас. (34 п. - 35 °С) (10 п. - 33°С) 1,2 х 106 20 в/в <8 <8 149,3 128 170,7   107   85,3     106,7
и/н <8 <8 13,3 18,7 18,7   10,7   8,0     5,3
С-77 48 пас. (34 п. - 35°С) (14 п. - 33°С) 1,2 х 106 20 в/в <8 <8 128,0 90,7 149,3   170,7   192     362,7
и/н <8 <8 5,3 10,7 16,0   21,3   2,7     < 8
С-74 7 пас. 1,6 х 106 80 в/в <8   43,7 96,0 149,3 106,6 117,3 74,6 74,6 64,0    
и/н <8   <8 <8 32 42,7 74,6 74,6 74,6 58,7    
С-74 30 пас. 2,2х 106 40 в/в <8   29,3 37,3 26,7 37,3 53,3 48 48 21,3 21,3  
и/н <8   <8 <8 <8 <8 < 8 <8 <8 <8 <8  
С-74 43 пас. 4,5x10s 40 в/в <4   10,7   53,3   149,3 256        
и/н <4   <4   <8   2,7 16        
С-74 54 пас. (44 п. - 35 °С) (10 п. - 33°С) 9,1x10s 10 в/в <8 <8 <8 18,7 192   202,7   202,6     117,3
и/н <8 <8 <8 2,7 8   32   42,7     21,3
С-74 60 пас. (44 п. - 35°С) (16 п. - 33°С) 3,7x10s 10 в/в <8 <8 <8 10,7 34,7   58,7   42,7     29,3
и/н <8 <8 <8 <8 2,7   < 8   <8     2,7
RA 27/3 вакцина Serum Institute, Индия 4,7x10*   в/в <8 <8 5,3 <8 <8 <8 5,3 <8 <8 <8 <8 <8
и/н <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8 <8

"Титры антител к вирусу краснухи указаны в средних арифметических величинах; **в/в - внутривенно; ***и/н - интраназально.

Таблица 4. Титры антител, тормозящих гемагглютинацию антигена вируса краснухи в сыворотках крови кроликов, иммунизированных внутривенно или интраназально разными штаммами этого вируса