Эпидемиологическая и клинико-иммунологическая характеристика иксодовых клещевых боррелиозов и микст-форм клещевых инфекций на Южном Урале

17.08.2009

Материалы и методы

Проанализирована заболеваемость ИКБ и КЭ за 10 лет (1998 - 2008 гг.) в Челябинске и Челябинской области. Эпидемиологическое обследование типичных природных очагов включало определение спонтанной инфицированности клещей боррелиями, выявление структуры циркулирующих геновидов Borrelia burgdorferi sensu lato, анализ инфицированности иксодовых клещей вирусом КЭ, влияния антропогенного фактора на формирование заболеваемости. Для обнаружения боррелий в клещах применяли метод темнопольной микроскопии фиксированных препаратов содержимого кишечника клеща. Также для индикации и идентификации боррелий в исследуемом материале использовали ПЦР на основе тест-систем «Векто-Лайм-ДНК-ампли» производства «Вектор-Бест» с прай-мерами к антигену p41(Flab) и Amplisens B.bs.l-Fl. Генетическая вариабельность боррелий изучена на материале 350 экземпляров клещей I. persulcatus, 80 образцов крови больных ИКБ, взятых в различные сроки от начала заболевания, 30 проб мочи и 10 проб спинномозговой жидкости. Определение IgM- и IgG-антител в ИФА осуществляли с помощью тест-систем «Боррелиоз-ИФА-комби», «Боррелиоз-ИФА-скрининг» (ООО «Омникс», Санкт-Петербург) по инструкции производителя. Экспресс-индикацию антигена вируса КЭ в клещах и ликворе людей проводили методом ИФА с тест-системой ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск. Также для подтверждения диагноза КЭ использовали тест-систему на специфические антитела классов IgM и IgG к вирусу КЭ производства «Вектор-Бест». Под наблюдением на базе клиники кафедры инфекционных болезней ГОУ «ВПО «Челябинская ГМА», Городского центра нейроинфекций, 1-го и 4-го инфекционных отделений ГКБ № 8 Челябинска с 2003 по 2008 год находилось 511 больных с различными клиническими формами инфекций, передающихся иксодовыми клещами. Их них 260 - больные ИКБ, 161 - КЭ и 94 - больные микст-инфекцией (КЭ + ИКБ). Попу-ляционный и субпопуляционный спектр лимфоцитов ликвора изучали методом лазерной проточной цитометрии на цитофлюориметре фирмы Beckman Coulter, модель Epics XL, с использованием моно-клональных антител фирмы CALTAG Laboratories против CD3, CD4, CD8, CD20, CD14, CD33, CD95, CD16/56+. Количественную оценку содержания оксида азота (NO) в ликворе и крови проводили фотоколориметрическим методом с помощью реакции Грисса в модификации Э.Н. Коробейниковой (2002 г.) по суммарному содержанию конечных стабильных метаболитов оксида азота. Общую активность комплемента ликвора и крови определяли по 50%-ному гемолизу, а активность компонентов классического пути активации системы (С1 - С5) -методом молекулярного гемолитического титрования. Определение содержания субклассов IgG (G1 - G4), уровня TNF-альфа и белков теплового шока (ферритина) в ликворе и сыворотке крови проводили методом ИФА (с помощью тест-систем фирмы «Вектор-Бест» и «Биохиммак» соответственно). Для статистической обработки результатов использовали стандартные методы вариационной статистики в рамках программного обеспечения Statistica for Windows, версия 5,5. Для проверки «нулевой» гипотезы использовали непараметрические критерии Манна-Уитни, Колмогорова-Смирнова. Различия между группами считали статистически достоверными при p < 0,05.

Результаты и обсуждение

Клинико-эпидемиологический анализ инфекций, передающихся иксодовыми клещами, на большинстве территорий Южного Урала показал, что ведущее место в заболеваемости населения занимают иксодовые клещевые боррелиозы и значительно меньшее - клещевой энцефалит. Практически за все годы наблюдения уровень заболеваемости ИКБ в Челябинской области был выше, чем по РФ (p < 0,001). Высокие показатели в Челябинске сохранялись в течение всех 10 лет и в среднем составили 11,6 с квартельным размахом 5,16 - 14,19 на 100 тыс. населения (по области -10,23 с квартельным размахом 4,04 - 16,42). Заболеваемость отличалась вариабельностью показателей в разные годы. Как представлено на рисунках 1 и 2, имелись периоды и синхронизации (1998 - 2000 гг.), и асинхронных изменений в динамике заболеваемости (2000 - 2004 гг.), что может свидетельствовать о существовании различных эпидемиологических закономерностей для ИКБ и КЭ в природных очагах этих инфекций. Нами был рассчитан ранговый коэффициент корреляции

Спирмена между заболеваемостью КЭ и ИКБ в Челябинской области и в Челябинске. Коэффициенты корреляции r были прямыми, высокодостоверными (p < 0,01) и составили +0,76 и +0,74. Полученные результаты могут говорить о том, что рост заболеваемости ИКБ является истинным. В то же время необходимо отметить, что возможности для увеличения числа регистрируемых случаев ИКБ за счет улучшения его диагностики, по всей видимости, сохраняются.

Заболеваемость КЭ и ИКБ в Челябинске в интенсивных показателях за период с 1998 по 2008 год

Рисунок 1. Заболеваемость КЭ и ИКБ в Челябинске в интенсивных показателях за период с 1998 по 2008 год