Результаты применения метода полимеразной цепной реакции

01.11.2010
Сроки от начала заболевания (в днях) Исследовано проб и процент (P ± 2mp) от их общего числа Из них число и процент (P ± 2mp) проб с ДНК боррелий
1 - 7 102 (35,4 ± 5,6) 0
8 - 14 97 (33,7 ± 5,6) 12 (12,4 ± 6,7)
15 - 21 40 (13,9 ± 4,0) 0
22 и больше 49 (17 ± 4,4) 0
Всего проб 288 (100%) 12 (4,1%)

Таблица 3. Результаты исследования в ПЦР проб крови от 124 пациентов с острыми лихорадочными заболеваниями, у которых ИКБ был исключен после клинико-серологического обследования

Возможность обнаружения боррелий в крови больных эритемной формой ИКБ была неоднократно продемонстрирована их изоляцией, в том числе и от пациентов из Пермского края [9, 10, 22, 26]. В нашем исследовании ДНК боррелий с 1-го по 7-й день от начала заболевания обнаруживалась лишь в небольшом числе проб крови (6,5 ± 5,1%) вне зависимости от формы заболевания, что, вероятно, связано со слабой спирохетемией в этот период. При развитии локализованной стадии первоначальное накопление возбудителя происходит в месте его первичного проникновения, чему способствуют многочисленные факторы специфической и неспецифической резистентности макроорганизма. По всей видимости, в этом кроется вероятная причина редкости детекции ДНК B. burgdorferi sensu lato в крови в первую неделю от начала заболевания. Ее наиболее часто удается обнаружить в крови пациентов на 8 - 14-й день от начала заболевания (см. табл. 2, 3; рис. 1), что совпадает с оптимальными сроками изоляции борре-лий из крови пациентов культуральным методом, то есть со сроками наиболее выраженной боррелиемии [10]. При этом положительными были не только пробы крови, взятые у больных в первые сутки специфического лечения, но и пробы, взятые на 10 - 14-й день с момента назначения антибиотикотерапии. Более того, большинство ПЦР-положительных результатов было именно среди вторых проб крови (рис. 2). Вероятно, определенную роль в этих случаях сыграла способность ПЦР выявлять ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, что, с одной стороны, увеличивает процент подтверждения ИКБ, а с другой, к сожалению, не позволяет судить о дальнейшем развитии инфекционного процесса. На третьей неделе от начала болезни процент ПЦР-положительных проб по сравнению с предыдущим сроком снизился практически в два раза, что, возможно, связано с начинающейся в это время элиминацией возбудителя из крови больных людей. Нам не удалось определить геномный материал боррелий в крови пациентов позднее 34-го дня от начала заболевания даже методом «nested» ПЦР.