Антигенные и биологические свойства вирусов гриппа

03.02.2011

В эпидемический сезон 2008 - 2009 годов на территории России вирусы гриппа типа В были изолированы в Калининграде, Нижнем Новгороде, Но- восибирске, Санкт-Петербурге, Самаре, Челябинске и Туле. В лаборатории эволюционной изменчивости вирусов гриппа в этот сезон было изучено 145 штаммов гриппа типа В - 25,6% от общего количества изолированных в эпидемический сезон возбудителей. При этом в Санкт-Петербурге лишь четыре изо-лята были выделены только на КЭ, 22 штамма - как на клеточной культуре MDCK, так и на КЭ, остальные 119 штаммов - только в культуре клеток MDCK. Вирусы 2008 - 2009 годов выделения принадлежали к викторианской ветви возбудителей гриппа В. Все изоляты реагировали до 1 - 1/2 гомологичного титра с антисывороткой к современному эталонному вирусу В/Брисбен/60/08, полностью утратив сродство с эталоном предыдущих лет - В/Малай-зия/2506/04, что свидетельствует о значительном антигенном дрейфе. Данные секвенирования выявили, что все штаммы приобрели замены, характерные для референс-штамма В/Брисбен/60/08: N75K, V146I, N165K, S172P и V225I. Кроме того, появились группы замен, типичные только для российских изо-лятов, такие как: R278K, S279I, P339L и R347K, - и ряд штаммоспецифических замен: T34I, M98P S142F, L268F, L269V, K307R, E313V, L329V, а также замены в положениях 197, 198, 199 и 333, которые привели к утрате сайта гликозилирования. Замена S142F произошла в области рецепторсвязывающего сайта. Следует отметить, что замены, приведшие к утрате сайта гликозилирования, были выявлены у вирусов, изолированных на развивающихся куриных эмбрионах, которые в свою очередь и отличались по своим антигенным свойствам от аналогов, выделенных на клеточной культуре MDCK, и реагировали с антисывороткой В/Брисбен/60/08 слабее - до 1/2 - 1/8 гомологичного титра.

В эпидемический сезон 2009 - 2010 годов вирусы гриппа типа В были вытеснены пандемическим вирусом гриппа подтипа A(H1N1) и изоляция штаммов началась только с середины февраля 2010 года в городах Дальневосточного округа. Вирусы были выделены в Екатеринбурге, Иркутске, Мурманске, Москве и Туле. В лаборатории эволюционной изменчивости вирусов гриппа было изучено 36 штаммов вируса гриппа В - 8% от общего количества изолированных возбудителей этого эпидемического сезона. По данным РТГА, штаммы нынешнего года принадлежали к викторианской линии. Вирусы взаимодействовали со штаммоспецифической сывороткой к референс-штамму В/Брисбен/60/08 до 1 - 1/4 гомологичного титра, а с сывороткой к современному диагностическому штамму В/Санкт-Петербург/40/09 - до 1 - 1/8 гомологичного титра.

Генетический анализ выявил общую замену для всех исследованных вирусов викторианской линии - I146V, которая приводит к потере сайта гли-козилирования. Эта мутация является реверсивной по отношению к современному вакцинному штамму В/Брисбен/60/08, так как у всех эталонных штаммов предыдущих лет (В/Виктория/2/87, В/Гон-конг/330/01, В/Малайзия/2506/04) в данной позиции находился валин и только у В/Брисбен/60/08-подобных штаммов появляется изолейцин и возникает сайт гликозилирования. Остальные аминокислотные замены, обнаруженные у российских изолятов 2010 года, являются одиночными. Среди них Т37А у изолята В/Екатеринбург/2/10 также приводит к утрате сайта гликозилирования. Стоит отметить, что данная замена не связана с системой выделения, поскольку штамм был выделен на клеточной культуре MDCK. Отмечены замены R101K, T214A, H314Y (у двух изолятов из Москвы и Тулы), F356L. При этом перечисленные аминокислотные замены не влияли на антигенные свойства вирусов.

Выводы

Таким образом, анализ антигенных свойств вирусов гриппа типа В показал, что с 2006 по 2010 год в России произошла смена эволюционных ветвей и у вновь пришедших представителей викторианской группы выявлен антигенный дрейф в молекулах гемагглютинина (табл. 1). Практически все вирусы гриппа типа В, выделенные в указанный период, были изолированы на клеточной культуре MDCK. По данным В.Т. Ивановой и соавт., в последнее время у вирусов гриппа типа В исчезает сайт гликозилиро-вания 187-й аминокислоты, что приводит к большему сродству с рецепторами клеток млекопитающих [4]. Тем не менее штаммы вирусов гриппа типа В по-прежнему выделяются и на куриных эмбрионах, хотя и в незначительном количестве. Представляет интерес тот факт, что при оценке ингибиторочувствительности эпидемических вирусов гриппа типа В обнаруживаются четкие различия между двумя эволюционными ветвями. До дивергенции все исследованные штаммы были высокоустойчивы к термостабильным ингибиторам нормальной сыворотки лошади. Вирусы викторианской ветви сохранили эту высокую устойчивость к ингибиторам, тогда как Ямагата-подобные вирусы оказались ингибиторочувстви-тельными [5]. Это свидетельствует о достаточно глубоких структурных изменениях вирусов ямагат-ской группы [2]. Однако отдельные современные викторианские вирусы 2010 года выделения стали проявлять ингибиторочувствительность.