Выявление маркеров аттенуации

03.02.2012
Накопление дикого варианта штамма С-77 вируса краснухи в культуральной жидкости при температуре культивирования 33 и 39 "С

Рисунок 2. Накопление дикого варианта штамма С-77 вируса краснухи в культуральной жидкости при температуре культивирования 33 и 39 "С

В работе был проведен анализ интенсивности репродукции са- и wt-вариантов штамма С-77 вируса краснухи при различных температурных режимах с использованием ПЦР-РВ. Данный метод обеспечивает меньшую длительность проведения анализа по сравнению с классическими методами титрования, а также высокую чувствительность и специфичность.

Достоверная разница (А 33 - 39 °С) между значениями титра са-варианта штамма С-77 при разных температурах культивирования наблюдалась на четвертый, пятый и шестой дни. Наиболее выраженное значение А 33 - 39 °С для са-варианта отмечено на пятый и шестой дни культивирования и составляло 1,5 и 1,4 lgTЦД50/млсоответственно (Р < 0,05), в то время как значение А 33 - 39 °С для wt-варианта было недостоверным.

Таким образом, са-вариант штамма С-77 обладает биологическими маркерами аттенуации: пониженной иммуногенностью на кроликах [3] и ca-фенотипом, что позволяет рассматривать его в качестве отечественного кандидата в вакцинный штамм.

Вывод

На основании анализа интенсивности репродукции дикого и ослабленного вариантов штамма С-77 при различных температурных режимах был выявлен фенотипический маркер аттенуа- ции вируса - достоверная разница в титре са- и 39 °С, при отсутствии достоверной разницы для варианта при температуре культивирования 33 дикого варианта. ^

Литература

  1. Дмитриев ГВ., Забияка Ю.И., Файзулоев Е.Б. и др. Характеристика дикого и ослабленного вариантов штамма С-77 вируса краснухи / Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных болезней: Сб. научных трудов // Под ред. А.А. Шапошникова, ГВ. Ющенко. № 10 (в печати). - М.: Гигиена, 2011.
  2. Забияка Ю.И., Файзулоев Е.Б., Борисова ТК. и др. Экспресс-метод оценки титра вируса краснухи в вируссодержащей жидкости с помощью ПЦР-РВ // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2010. № 5. с. 57 - 62.
  3. Зверев В.В., Десятскова Р.Г, Юминова Н.В. и др. Лабораторная характеристика ослабленных вариантов отечественного штамма вируса краснухи, адаптированных к культуре клеток Vero // Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2008. № 4. С 46 - 53.
  4. Masafumi S., Katsuhiro К., Tetsuo N. Histidine at position 1042 of the pl50 region of a KRT iive attenuated rubeiia vaccine strain is responsible for the temperature sensitivity // Vaccine. 2009. V. 27. R 234 - 242.
  5. Ohtawara M., Kobune R, Umino Y., Sugiura A. Inability of Japanese rubella vaccines to induce antibody response in rabbits is due to growth restriction at 39 degrees C // Arch. Virol. 1985. V 83 (3 - 4). R 217 - 227.