epidemiologyЭпидемиология и ВакцинопрофилактикаEpidemiology and Vaccinal Prevention2073-30462619-0494«Numicom» LLC10.31631/2073-3046-2016-15-1-77-85epidemiology-131Research ArticleВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКАVACCINAL PREVENTIONПолучение рекомбинантного аналога гликопротеина Е вируса Varicella zoster: клонирование, экспрессия и исследование антигенных свойствRecombinant Analogue of Varicella Zoster Virus Glycoprotein E: Cloning, Expression and Studying of AntigEn PropertiesАлаторцеваГ. И.AlatortsevaG. I.alatortseva@gmail.comСидоровА. В.SidorovA. V.sashasidorov@gmail.comНестеренкоЛ. Н.NesterenkoL. N.lnnesterenko@pochta.ruЛухверчикЛ. Н.LuhverchikL. N.lexx294@yandex.byАмиантоваИ. И.AmiantovaI. I.amianti@yandex.ruДоценкоВ. В.DocenkoV. V.VerraMal@gmail.comХыуФонг ФамHuyPhong Phamgraecumestnonlegiturhp2004@gmail.comМиловановаА. В.MilovanovaA. V.rose_48@mail.ruВыливаннаяО. Б.VylivannayaO. B.Vylivannaya@dcli.ruКазановаА. С.KazanovaA. C.pendelbus@gmail.comЛавровВ. В.LavrovV. V.v.f.lavrov@inbox.ruЗверевВ. В.ZverevV. V.vitalyzverev@outlook.comФГБНУ «НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»РоссияMechnikov Research Institute for Vaccines and SeraRussian FederationГБУЗ «Диагностический центр лабораторных исследований» Департамента здравоохранения города МосквыРоссияState BudgEtary Institution of Public Health«Diagnostic center of laboratory researches»Russian FederationФГБНУ «НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»; ГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздрава РоссииРоссияMechnikov Research Institute for Vaccines and Sera; State Educational Institution of Additional Professional Education «Medical Academy of Postgraduate Studies», Ministry of Healthcare of the Russian FederationRussian Federation2016200220161517785Copyright © Алаторцева Г.И., Сидоров А.В., Нестеренко Л.Н., Лухверчик Л.Н., Амиантова И.И., Доценко В.В., Хыу Ф.Ф., Милованова А.В., Выливанная О.Б., Казанова А.С., Лавров В.В., Зверев В.В., 20162016Алаторцева Г.И., Сидоров А.В., Нестеренко Л.Н., Лухверчик Л.Н., Амиантова И.И., Доценко В.В., Хыу Ф.Ф., Милованова А.В., Выливанная О.Б., Казанова А.С., Лавров В.В., Зверев В.В.Alatortseva G.I., Sidorov A.V., Nesterenko L.N., Luhverchik L.N., Amiantova I.I., Docenko V.V., Huy P.P., Milovanova A.V., Vylivannaya O.B., Kazanova A.C., Lavrov V.V., Zverev V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.epidemvac.ru/jour/article/view/131

Получен рекомбинантный антиген GE, содержащий слитый с в-галактозидазой E. coli фрагмент (Gly48 - Glu135) гликопротеина E (gE) вируса Varicella zoster (VZV). Антигенная специфичность рекомбинантного антигена подтверждена с помощью вестерн-блоттинга и конкурентного иммуноферментного анализа (ИФА) в сравнении с его коммерческими аналогами и натуральными вирусными антигенами. Выявлено взаимодействие рекомбинантного белка GE с IgG кроликов, иммунизированных вакцинным штаммом вируса. Методом ИФА показано взаимодействие белка GE с 66% сывороток крови больных опоясывающим лишаем и 35% сывороток лиц из групп сравнения, в том числе, сывороток, содержащих антитела к другим вирусам герпеса, сывороток здоровых доноров, а также пациентов с различными формами кишечной патологии. Таким образом, экспериментально обоснована возможность применения полученного нами рекомбинантного GE VZV, в качестве антигена в диагностических и исследовательских целях.

We made recombinant antigen GE containing fragment of VZV glycoprotein E (Gly48 - Glu135) fused to E. coli beta-galactosidase and confirmed its antigen specificity by Western blotting and competitive-inhibition enzyme immunoassay (EIA) in comparison with commercial analogues and natural viral antigens. We showed interaction of recombinant GE protein with IgG antibodies from rabbits immunized by vaccine viral strain. GE protein also specifically reacted in ELISA with 66% of sera from zoster patients and 35% of sera from control groups including sera containing antibodies to other herpes viruses, sera from healthy donors, and sera from patients with different forms of intestinal disorders. Consequently, we demonstrated possibility of application of our recombinant GE VZV as antigen for diagnostics and research use.

вирус Varicella zosterORF68гликопротеин Ерекомбинантный антигениммуноферментный анализVaricella Zoster VirusVZVopen reading frame 68ORF 68glycoprotein Grecombinant antigEnenzyme immunoassayReferencesKuhn J. E., Klaffke K., Munk K., Braun R.W. HSV-1 gB and VZV gp-II crossreactive antibodies in human sera. Arch. Virol. 1990; 112: 203 - 213.Kuhn J. E., Klaffke K., Munk K., Braun R.W. 1990. HSV-1 gB and VZV gp-II crossreactive antibodies in human sera. Arch. Virol. 112: 203 – 213.Kutinova L., Hainz P, Ludvikova V., Maresova L., Nemeckova S. Immune response to vaccinia virus recombinants expressing glycoproteins gE, gB, gH, and gL of varicella-zoster virus. Virology. 2001; 280: 211 - 220.Kutinova L., Hainz P., Ludvikova V., Maresova L., Nemeckova S. Immune response to vaccinia virus recombinants expressing glycoproteins gE, gB, gH, and gL of varicella-zoster virus. Virology. 2001; 280: 211 – 220.Montalvo E.A., Parmley R.T., Grose C. Structural analysis of the varicella-zoster virus gp98-gp62 complex: posttranslational addition of Nlinked and O-linked oligosaccharide moieties. J. Virol. 1985; 53: 761 - 770.Montalvo E.A., Parmley R.T., Grose C. Structural analysis of the varicella-zoster virus gp98-gp62 complex: posttranslational addition of Nlinked and O-linked oligosaccharide moieties. J. Virol. 1985; 53: 761 – 770.Haumont M., Jacquet A., Massaer M., Deleersnyder V., Mazzu P, Bollen A. et al. Purification, characterization and immunogenicity of recombinant varicella-zoster virus glycoprotein gE secreted by Chinese hamster ovary cells. Virus Res. 1996; 40: 199 - 204.Haumont M., Jacquet A., Massaer M., Deleersnyder V., Mazzu P., Bollen A. et al. Purification, characterization and immunogenicity of recombinant varicellazoster virus glycoprotein gE secreted by Chinese hamster ovary cells. Virus Res. 1996; 40: 199 – 204.Grahn A., Studahl M., Nilsson S., Thomsson E., B ckstr m M., Bergstr m T. Varicella-Zoster Virus (VZV) Glycoprotein E Is a Serological AntigEn for Detection of Intrathecal Antibodies to VZV in Central Nervous System Infections, without Cross-Reaction to Herpes Simplex Virus 1. dinical and vaccine immunology. 2011; 18 (8): 1336 - 1342.Grahn A., Studahl M., Nilsson S., Thomsson E., Bäckström M., Bergström T. Varicella-Zoster Virus (VZV) Glycoprotein E Is a Serological AntigEn for Detection of Intrathecal Antibodies to VZV in Central Nervous System Infections, without Cross-Reaction to Herpes Simplex Virus 1. Сlinical and vaccine immunology. 2011; 18 (8): 1336 – 1342.Алаторцев В.Е., Алаторцева Г.И. Штамм бактерий Escherichia coli, используемый для получения рекомбинантных белков. Патент РФ, № 2043409, 1995.Alatortsev V.E., Alatortseva G.I. Strain of bacterium Escherichia coli used for ecombinant proteins preparing. Patent RF, № 2043409; 1995 (in Russian)Алаторцев В.Е., Алаторцева Г.И. Вектор pEL5c предназначенный для экспрессии чужеродной ДНК. Патент РФ, 2071503, 1997.Alatortsev V.E., Alatortseva G.I. Vector pel5с designated for foreign DNA expression. Patent RF, № 20715031; 1997 (in Russian).Новое в клонировании ДНК. Методы. Пер. с англ. Гловер Д., ред. Москва; 1989: 122 - 128.News in DNA cloning. A practical approach. Ed.: Glover D.M. Moscow; 1989: 122 – 128 (in Russian).Sameh Magdeldin and Annette Moser. Affinity Cromatography: Principles and applications, affinity chromatography Ed.: dr. S. Magdeldin. In Tech. 2012: 70 - 75.Sameh Magdeldin and Annette Moser. Affinity Cromatography: Principles and applications, affinity chromatography Ed.: dr. S. Magdeldin. In Tech. 2012: 70 – 75.Virca G.D., Travis J., Hall PK., Roberts R.C. Purification of -2-Macroglobulin by chromatography on Cibacron Blue sepharose. Analytical Biochemistry. 1978; 8: 274 - 276.Virca G.D., Travis J., Hall P.K., Roberts R.C. Purification of α-2-Macroglobulin by chromatography on Cibacron Blue sepharose. Analytical Biochemistry. 1978; 8: 274 – 276.Rattana Wongchuphan, Beng Ti Tey, Wen Siang Tan, Senthil Kumar Subramanian, Farah Saleena Taip, Tau Chuan Ling. Purification of rabbit polyclonal immunoglobulin G using anion exchangers. Process Biochemistry 2011; 46: 101 - 107.Rattana Wongchuphan, Beng Ti Tey, Wen Siang Tan, Senthil Kumar Subramanian, Farah Saleena Taip, Tau Chuan Ling. Purification of rabbit polyclonal immunoglobulin G using anion exchangers. Process Biochemistry. 2011; 46: 101 – 107.Практическая химия белка. Пер. с англ. Дарбре А., ред. Москва; 1989: 1 - 621.Practical Protein Chemistry. Ed. Darbre. A. 1989: 1 – 621 (in Russian).Towbin H., Staehlin T., Gordon Y. Proc. nat. Acad. Sci. USA. 1979; 76: 4350 - 4359.Towbin H., Staehlin T., Gordon Y. Proc. nat. Acad. Sci. USA. 1979; 76: 4350 – 4359.Ceroni A., Sibani S., Baiker A., Pothineni V.R., Bailer S.M., LaBaer J. et al. Systematic analysis of the IgG antibody immune response against Varicella zoster virus (VZV) using a self-assembled protein microarray. Mol Biosyst. 2010; 6 (9): 1604 - 1610. Doi: 10.1039/c003798b. Epub 2010 Jun 1.Ceroni A., Sibani S., Baiker A., Pothineni V.R., Bailer S.M., LaBaer J. et al. Systematic analysis of the IgG antibody immune response against Varicella zoster virus (VZV) using a self-assembled protein microarray. Mol Biosyst. 2010; 6 (9): 1604 – 1610. Doi: 10.1039/c003798b. Epub 2010 Jun 1.Vizoso Pinto M. G., Pfrepper K.-I., Janke T., Noelting C., Sander M., Lueking A. et al. A systematic approach for the identification of novel, serologically reactive recombinant Varicella-Zoster Virus (VZV) antigens Virology Journal 2010, 7:165Vizoso Pinto M. G., Pfrepper K.-I., Janke T., Noelting C., Sander M., Lueking A. et al. A systematic approach for the identification of novel, serologically reactive recombinant Varicella-Zoster Virus (VZV) antigens Virology Journal. 2010; 7: 165.Park R., Hwang J.Y., Lee K.I., Namkoong S., Choi.SK., Park S. et al. Measurement of antibodies to varicella-zoster virus using a virus-free fluorescent-antibody-to-membrane-antigen (FAMA) test Microbiol Biotechnol. 2015; 25 (2): 268 - 273Park R., Hwang J.Y., Lee K.I., Namkoong S., Choi .SK., Park S. et al. Measurement of antibodies to varicella-zoster virus using a virus-free fluorescent-antibodyto- membrane-antigen (FAMA) test Microbiol Biotechnol. 2015; 25 (2): 268 – 273.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.