Татьяна Николаевна Щуковская – д. м. н., профессор, главный научный сотрудник отдела иммунологии
СаратовТел. +7 (909) 330-25-83
Tatiana N. Shchukovskaya – Dr. Sci. (Med.), Professor, Head Researcher, Department of Immunology
SaratovTel. +7 (909) 330-25-83
Анастасия Юрьевна Гончарова – к. м. н., научный сотрудник отдела иммунологии
СаратовТел. +7 (927) 110-83-55
Anastasia Yu. Goncharova – Cand. Sci. (Med.), Researcher, Department of Immunology
SaratovTel. +7 (927) 110-83-55
Светлана Александровна Бугоркова – д. м. н., и.о. зав. отделом иммунологии
Саратов
Svetlana A. Bugorkova – Dr. Sci. (Med.), Head, Department of Immunology
Saratov
Ольга Михайловна Кудрявцева – к. б. н., старший научный сотрудник отдела иммунологии
СаратовТел. +7 (905) 369-71-99
Olga M. Kudryavtseva – Cand. Sci. (Bio.), Senior Researcher, Department of Immunology
SaratovTel. +7 (905) 369-71-99
Наталья Евгеньевна Щербакова – научный сотрудник отдела диагностики инфекционных болезней
СаратовТел. +7 (8452) 51-52-11
Natalya E. Shcherbakova – researcher at the Department of Diagnostics of Infectious Diseases
SaratovTel. +7 (845-2) 51-52-11
Адиля Саберьжановна Абдрашитова – к. б. н., ведущий научный сотрудник отдела диагностики инфекционных болезней
СаратовТел. +7 (8452) 51-52-11
Adilya S. Abdrashitova – Cand. Sci. (Bio.), leader researcher at the Department of Diagnostics of Infectious Diseases
SaratovTel. +7 (845-2) 51-52-11
Актуальность. Для профилактики чумы в России используют вакцину чумную живую на основе вакцинного штамма Yersinia pestis EV НИИЭГ, вызывающую развитие иммунитета длительностью до 1 года, что обусловливает необходимость проведения ежегодной ревакцинации прививаемого контингента. Разработка новых способов усиления иммуногенности вакцинного штамма Y. pestis EV НИИЭГ является актуальной задачей. Цель – изучение влияния иммуноадъюванта азоксимера бромида (полиоксидония, ПО) на иммунобиологические свойства Y. pestis EV НИИЭГ в условиях культивирования. Материалы и методы. Y. pestis EV НИИЭГ выращивали при 28 °С в течение 48 ч на LB агаре рН 7,2 (Sigma-Aldrich, USA) как с ПО, так и без. Снятие масс-спектров экстрактов клеток Y. pestis EV НИИЭГ проводили на масс-спектрометре MicroflexТМ LT (Bruker Daltonics, Германия). Протективные свойства оценивали в условиях моделирования чумной инфекции по интегральному показателю ImD50 на морских свинках и мышах BALB\c при заражении вирулентными штаммами основного подвида Y. pestis 231, Y. pestis Р–13268 Вьетнам. Иммуногенность – по уровню антител к F1 чумного микроба методом ТИФА. Результаты и обсуждение. Внесение ПО в среду культивирования вызывает достоверное повышение иммуногенности вакцинного штамма Y. pestis EV НИИЭГ, сопровождающееся ростом продукции антител к капсульному антигену F1 чумного микроба и выраженным усилением защитного действия вакцинного штамма Y. pestis EV линии НИИЭГ при моделировании бубонной формы чумы на двух видах экспериментальных животных– мышах линии BALB\c и морских свинках. Зарегистрировано значимое (р < 0,05) уменьшение величины ImD50 для культур вакцинного штамма Y. pestis EV линии НИИЭГ, выращенных на среде с добавлением ПО, по сравнению с ImD50 для Y. pestis EV НИИЭГ в стандартных условиях культивирования. Выводы. Выявлены изменения количественных и качественных характеристик на масс-спектрах Y. pestis EV НИИЭГ, выращенного на среде с ПО, сопровождавшиеся повышением его иммуногенной и протективной активности. Морфологические исследования подтверждают отсутствие влияния ПО на безвредность вакцинного штамма.
Background. The live-attenuated vaccine based on the Yersinia pestis strain EV line NIIEG is still used in Russia, providing protective efficacy against plague. Nevertheless, there is an urgent need for developing new ways to increase the immunogenicity of the Y. pestis EV NIIEG vaccine strain. In this study, the ability of direct action of immunoadjuvant azoximer bromide (polyoxidonium, PO) on the immunobiological properties of vaccine strain Y. pestis EV NIIEG during cultivation on a dense nutrient medium was evaluated. Materials & Methods. Y.pestis EV NIIEG, cultivated at 28 °С for 48 h on LB agar, Miller pH 7.2 ± 0.1 (Sigma-Aldrich, USA) with the addition of PO and without. MALDI-TOF mass-spectrometry was deployed for the obtainment of mass-spectra of ribosomal proteins from Y. pestis EV NIIEG cells on the MicroflexTM LT mass spectrometer (Bruker Daltonics, Germany). Protective efficacy was evaluated under subcutaneously challenge guinea pigs and mice BALB's with 400 LD50 doses of the Y. pestis 231, Y. pestis P-13268 Vietnam (MLD=5 CFU). Antibody titers to F1 in serum were determined using an ELISA. Results. The addition of the therapeutic concentration of PO in the cultivation medium induced a significant increase in the immunogenicity of Y. pestis EV NIIEG that resulted in enhancement of serum antibody levels against Y. pestis F1 antigen and several times the growth of protective efficacy in the bubonic plague model on two types of experimental animals. ImD50 of the vaccine strain Y. pestis EV NIIEG, cultivated with PO, was significantly (p < 0,05) lower in comparison to ImD50 for Y. pestis EV NIIEG in standard cultivation conditions. One year of storage at a temperature of 4 °С did not alter the protective properties of the vaccine strain Y. pestis EV NIIEG, cultivated with PO. Conclusions. Morphological studies confirmed the absence of influence PO introduction into the cultivation environment on the safety of the vaccine strain. MALDI-TOF MS profile of the Y. pestis EV NIIEG, cultivated with PO, had peaks characteristic features. The mass peak at m/z 3,061 was significantly down-regulated and new mass peaks at m/z 2,759, m/z 3,533 were determined. These changes are accompanied by the increase of Y. pestis EV NIIEG immunogenicity.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.