<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">epidemiology</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Эпидемиология и Вакцинопрофилактика</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Epidemiology and Vaccinal Prevention</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">2073-3046</issn><issn pub-type="epub">2619-0494</issn><publisher><publisher-name>«Numicom» LLC</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.31631/2073-3046-2020-19-1-35-42</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">epidemiology-923</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL ARTICLES</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Серотипнезависимая протективная активность экспериментальных белоксодержащих препаратов Streptococcus pneumoniae, полученных из свежевыделенных и музейных штаммов</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Experimental Protein-Containing Preparations Streptococcus pneumoniae, Obtained from Fresh Isolated Strains and Museum</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-0875-4141</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Кукина</surname><given-names>О. М.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kukina</surname><given-names>O. M.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Ольга Максимовна Кукина - младший научный сотрудник лаборатории экспериментальной микробиологии.</p><p>Москва, +7 (495)-916-20-47</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Olga M. Kukina - junior researcher of the laboratory of experimental microbiology.</p><p>Moscow, +7 (495)-916-20-47</p></bio><email xlink:type="simple">kukina1994@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Грубер</surname><given-names>И. М.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Gruber</surname><given-names>I. M.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Ирина Мироновна Грубер - доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией экспериментальной микробиологии.</p><p>Москва, +7 (495)-916-20-47</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Irina M. Gruber - Dr. Sci (Med), professor, head of the laboratory of experimental microbiology.</p><p>Moscow, +7 (495)-916-20-47</p></bio><email xlink:type="simple">igruber_instmech@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Ахматова</surname><given-names>Н. К.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Akhmatova</surname><given-names>N. K.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Нэлли Кимовна Ахматова - доктор медицинских наук, заведующая лабораторией механизмов регуляции иммунитета.</p><p>Москва, +7 (919)-7765570</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Nelli K. Akhmatova - Dr. Sci (Med), head of the laboratory of immunity regulation mechanisms.</p><p>Moscow, +7 (919)-7765570</p></bio><email xlink:type="simple">aneMy@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Курбатова</surname><given-names>Е. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kurbatova</surname><given-names>E. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Екатерина Алексеевна Курбатова - доктор медицинских наук, профессор,заведующая лабораторией терапевтических вакцин.</p><p>Москва,+7(495)-917-57-74</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Ekaterina A. Kurbatova - Dr. Sci (Med), professor, head of the laboratory of therapeutic vaccines.</p><p>Moscow, +7 (495) -917-57-74</p></bio><email xlink:type="simple">kurbatova6162@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Жигунова</surname><given-names>О. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Zhigunova</surname><given-names>O. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Ольга Валерьевна Жигунова - младший научный сотрудник лаборатории экспериментальной микробиологии.</p><p>Москва, +7(495)-916-20-47</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Olga V. Zhigunova - junior researcher of the laboratory of experimental microbiology.</p><p>Moscow, +7 (495)-916-20-47</p></bio><email xlink:type="simple">kileva@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Ястребова</surname><given-names>Н. Е.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Yastrebova</surname><given-names>N. E.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Наталия Евгеньевна Ястребова - доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией иммунохимической диагностики.</p><p>Москва, +7 (495)-917-07-41</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Natalia E. Yastrebova - Dr. Sci (Med), professor, head of the laboratory of immunochemical diagnostics.</p><p>Moscow,+7 (495) -917-07-4</p></bio><email xlink:type="simple">yastreb03@rambler.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Королёва</surname><given-names>И. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Koroleva</surname><given-names>I. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Ирина Станиславовна Королева - доктор медицинских наук, заведующая лабораторией эпидемиологии менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов.</p><p>Москва, +7 (495)-672-11-28</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Irina S. Koroleva - Dr. Sci (Med), head of the laboratory of epidemiology of meningococcal infection and purulent bacterial meningitis.</p><p>Moscow,8 (495) -672-11-28</p></bio><email xlink:type="simple">irina-korol@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Белошицкий</surname><given-names>Г. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Beloshitsky</surname><given-names>G. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Григорий Владимирович Белошицкий - старший научный сотрудник лаборатории эпидемиологии менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов.</p><p>Москва,+7 (495)-672-11-28</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Grigory V. Beloshitsky - senior researcher of the laboratory of epidemiology of meningococcal infection and purulent bacterial meningitis.</p><p>Moscow, +7 (495) -672-11-28</p></bio><email xlink:type="simple">g-belosh1@yandex.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток имени И. И. Мечникова</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru"><institution>ФБУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Central Research Institute of Epidemiology</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2020</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>14</day><month>03</month><year>2020</year></pub-date><volume>19</volume><issue>1</issue><fpage>35</fpage><lpage>42</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Кукина О.М., Грубер И.М., Ахматова Н.К., Курбатова Е.А., Жигунова О.В., Ястребова Н.Е., Королёва И.С., Белошицкий Г.В., 2020</copyright-statement><copyright-year>2020</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Кукина О.М., Грубер И.М., Ахматова Н.К., Курбатова Е.А., Жигунова О.В., Ястребова Н.Е., Королёва И.С., Белошицкий Г.В.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Kukina O.M., Gruber I.M., Akhmatova N.K., Kurbatova E.A., Zhigunova O.V., Yastrebova N.E., Koroleva I.S., Beloshitsky G.V.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.epidemvac.ru/jour/article/view/923">https://www.epidemvac.ru/jour/article/view/923</self-uri><abstract><sec><title>Актуальность</title><p>Актуальность. Вакцины на основе капсульных полисахаридов пневмококка не активны в отношении серотипов, не входящих в состав вакцины, бескапсульных штаммов и не защищают от носительства, вызванного другими серотипами. Их применение приводит к замещению доминирующих серотипов пневмококка, появлению высоковирулентных штаммов, изменению микробного пейзажа слизистых оболочек за счет появления других этиологически значимых возбудителей заболеваний респираторного тракта. Это требует создания внутривидового противопневмококкового иммунитета, чему будет способствовать разработка серотипнезависимых препаратов, в состав которых будут входить белоксодержащие антигены пневмококка.</p></sec><sec><title>Цель работы</title><p>Цель работы. Исследование серотипнезависимой протективной активности белоксодержащих антигенных компонентов, полученных из свежевыделенных и музейных штаммов S. pneumoniae.</p></sec><sec><title>Материалы и методы</title><p>Материалы и методы. Использованы штаммы трёх серотипов S. pneumoniae: музейных - серотипов 6В № 296, 19F № 298 и 10А № 297 и свежевыделенных (из ликвора больных гнойным менингитом) - серотипов 6В № 1121, 19F № 1055 и серогруппы 10 № 1193. В полученных экспериментальных белоксодержащих препаратах (ЭБСП) определяли содержание белка. Протективную активность ЭБСП и вирулентность штаммов определяли при внутрибрюшинных иммунизации и заражения мышей линии BALB/c; LD50 рассчитывали по общепринятой модифицированной формуле Кербера. Иммунофенотип лимфоцитов, предварительно выделенных из цельной крови доноров, изучали с помощью метода проточной цитометрии. Статистический анализ материалов проведен с применением параметрических и непараметрических методов с использованием пакета прикладных программ «Statistica for Windows», ver. 7.0 (Stat Soft, Inc); при статистическом анализе уровень значимости р принимался равным &lt; 0,05.</p></sec><sec><title>Результаты и обсуждение</title><p>Результаты и обсуждение. При культивировании происходило интенсивное накопление биомассы музейного штамма № 296 при низкой его вирулентности и более низкое вирулентного штамма № 1121, выделенного из ликвора больного. По содержанию белка препараты из штаммов серотипа 6В не различались. Штаммы других серотипов, выделенные при генерализованном инфекционном процессе, были более вирулентны, чем музейные. Влияние на иммунофенотип лимфоцитов человека фракций 50-100 kDa, выделенных из исходных препаратов, полученных при культивировании штаммов серотипа 6В значимо возрастало только под действием препарата из музейного штамма. При исследовании протективной активности исходных препаратов из штаммов серотипа 6В и фракций с ММ 50-100 kDa только при трёхкратной иммунизации исходным препаратом из штамма № 296, в дозе 20 мкг белка на мышь, выявлена существенно большая выживаемость иммунизированных мышей, от заражения свежевыделенным вирулентным штаммом № 1121 гомологичного серотипа. Фракция 30-100 kDa обеспечила защиту мышей, двукратно иммунизированных 50 мкг белка на мышь, с высоким индексом эффективности, равным 8,9, даже после заражения свежевыделенным штаммом гетерологичного серотипа S. pneumoniae - серотипа 3 № 10196.</p></sec><sec><title>Выводы</title><p>Выводы. Белоксодержащая фракция с ММ 30-100 кДа, полученная из слабовирулентного музейного штамма S. pneumoniae серотипа 6В № 296, при двукратной иммунизации обладала протективной активностью в отношении свежевыделенного вирулентного штамма гетерологичного серотипа. Под действием изученных белоксодержащих фракций показана активация клеточного звена иммунной системы с вовлечением врожденных эффекторов и Т-лимфоцитов. Эти данные можно считать обоснованием дальнейшего изучения ЭБСП для оценки возможности их использования при конструировании противопневмококкового препарата с серотипнезависимой протективной активностью.</p></sec></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><sec><title>Relevance</title><p>Relevance. Vaccines based on capsular polysaccharides of pneumococci are not active against serotypes that are not included in the vaccine, non-capsulated strains and do not protect against carriage caused by other serotypes. Their use leads to the replacement of dominant serotypes of pneumococci, the appearance of highly virulent strains, changes in the microbial landscape of mucous membranes due to the appearance of other etiologically significant pathogens of respiratory tract diseases. This requires the creation of intraspecific anti-pneumococcal immunity, which will be facilitated by the development of serotype-dependent drugs, which will include protein-containing antigens of pneumococci.</p></sec><sec><title>Objective</title><p>Objective. Study of serotype-independent activity of protein-containing antigenic components obtained from freshly isolated and archival strains of S. pneumoniae.</p></sec><sec><title>Materials and methods</title><p>Materials and methods. Strains of three serotypes of S. pneumoniae were used: archival strains of serotypes 6B N296, 19F N 298 and 10A N297 and freshly isolated serotypes 6B N 1121, 19F N 1055 and serogroup 10 N 1193 (from the cerebrospinal fluid of patients with purulent meningitis).. In the experimental protein-containing preparations EPCP obtained, the protein content was determined. Protective activity of EPCP and virulence of strains were determined in the model of intraperitoneal immunization and infection of BALB/c mice; LD50 was calculated using the generally accepted modified Kerber formula. The immunophenotype of lymphocytes previously isolated from donor-mice whole blood was studied by flow cytometry. Statistical analysis of the materials was carried out using parametric and nonparametric methods using the application package «Statistica for Windows», ver. 7.0 (Stat Soft, Inc); in statistical analysis, the significance level of p was assumed to be &lt; 0.05.</p></sec><sec><title>Results and discussion</title><p>Results and discussion. During cultivation there was the analysis of growth dynamics showed intensive accumulation of biomass of the archival strain N296 with low virulence, and lower - by virulent strain N 1121 isolated from the patient's cerebrospinal fluid. The protein content of drugs from serotype 6B strains did not differ. The strains of other serotypes isolated during the generalized infectious process were also more virulent than the archival strain. The effect on the immunophenotype of human lymphocytes of fractions of 50-100 kDa isolated from the initial preparations obtained by culturing serotype 6B, significantly increased only under the influence of the preparation from the archival strain. In the study of protective activity of the initial preparations from strains of serotype 6B and fractions with MM 50-100 kDa only triple immunization with the initial preparation from strain N 296, at a dose of 20 micrograms of protein per mouse, led to significantly greater survival of immunized mice from infection with the newly isolated virulent strain N 1121 of homologous serotype. A fraction of 30-100 kDa provided protection of mice twice immunized with 50 mkg of protein per mouse, with a high efficacy index of 8.9, even after infection with a freshly isolated strain of heterologous S. pneumoniae serotype 3 N 10196.</p></sec><sec><title>Conclusion</title><p>Conclusion. The protein-containing fraction with MM 30-100 kDa obtained from a low virulent archival strain of S. pneumoniae serotype 6B N296 possessed protective activity against a newly isolated virulent strain of heterologous serotype after double immunization. Under the action of the studied protein-containing fractions, activation of the cellular component of immune system with the involvement of innate immunity effectors and T-lymphocytes is shown. These data can be considered as a evidence for further study of EPCP to assess the possibility of their use in the design of anti-pneumococcal drug with serotype-independent protective activity.</p></sec></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>Streptococcus pneumoniae</kwd><kwd>серотипнезависимая протективная активность</kwd><kwd>вирулентность</kwd><kwd>экспериментальный белоксодержащий препарат</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>Streptococcus pneumoniae</kwd><kwd>serotype-independent protective activity</kwd><kwd>virulence</kwd><kwd>experimental protein-containing preparation</kwd></kwd-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Richter SS, Diekema DJ, Heilmann KP et al. Changes in pneumococcal serotypes and antimicrobial resistance after introduction of the 13-valent conjugate vaccine in the United States. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2014; 58:6484-6489. DOI: 10.1128/AAC.03344-14</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Richter SS, Diekema DJ, Heilmann KP et al. Changes in pneumococcal serotypes and antimicrobial resistance after introduction of the 13-valent conjugate vaccine in the United States. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2014; 58:6484-9. DOI: 10.1128/AAC.03344-14</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Weinberger DM, Malley R, Lipsitch М. Serotype replacement in disease after pneumococcal vaccination. Lancet. 2011; 378:1962-1973. DOI: W.W16/S0140-6736(W)62225-8</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Weinberger DM, Malley R, Lipsitch М. Serotype replacement in disease after pneumococcal vaccination. Lancet. 2011; 378 (9807): 1962-73. DOI: 10.1016/S0140-6736(10)62225-8</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Маянский Н. А, Савинова Т. А., Алябьева О. А. и др. Антибиотикорезистентность и клональная эволюция Streptococcus pneumoniae серотипа 19 А в России, 2003-2013 гг. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. //2017. Т. 19, № 2. С. 145 -151.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Mayansky NA., Savinova TA., Alyabyeva NM. et al. Antimicrobal resistence and clonal evolution of Streptococcus pneumoniae serotype 19A in Russia during 2002-2013. Clinical Miccrobiology and Antimicrobial Chemotherapy. 2017; 19 (2): 145-51 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Feldman C, Anderson R. Review: current and new generation pneumococcal vaccines // Journal of Infection. 2014; 69 (4): 309-325.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Feldman C, Anderson R. Review: current and new generation pneumococcal vaccines. Journal of Infection. 2014; 69 (4): 309-25. DOI: 10.1016/j.jinf.2014.06.006.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Poland GA. The prevention of pneumococcal disease by vaccines: promises and challenges. // Infectious Disease Clinics of North A merica. 2001. Vol. 15. P. 97-122.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Poland GA. The prevention of pneumococcal disease by vaccines: promises and challenges. Infectious Disease Clinics of North America. 2001; 15:97-122. DOI: 10.1016/s0891-5520(05)70270-1.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Hicks LA, Harison LH, Flannery B et al. Incidence of pneumococcal disease due to non-pneumococcal conjugate vaccine (PCV7) serotypes in the United States during the era of widespread PCV7 vaccination. 1998-2004. // The Journal of Infectious Diseases. 2007. Vol. 196. Р. 1346-1354.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Hicks LA, Harison LH, Flannery B et al. Incidence of pneumococcal disease due to non-pneumococcal conjugate vaccine (PCV7) serotypes in the United States during the era of widespread PCV7 vaccination. 1998-2004. The Journal of Infectious Diseases. 2007; 196:1346-54. DOI: 10.1086/521626</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit7"><label>7</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Pelton SI, Huot H, Finkelstein JA et al. Emergence of 19A as virulent and multidrug resistant pneumococcus in Massachusetts following universal immunization of infants with pneumococcal conjugate vaccine. // The Pediatric Infectious Disease Journal. 2007. Vol. 26. N 6. Р. 468-472.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Pelton SI., Huot H., Finkelstein JA. et al. Emergence of 19A as virulent and multidrug resistant pneumococcus in Massachusetts following universal immunization of infants with pneumococcal conjugate vaccine. The Pediatric Infectious Disease Journal. 2007; 26 (6):468-72. DOI: 10.1097/inf.0b013e31803df9ca</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit8"><label>8</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Pilishvili T, Bennett NM. Pneumococcal disease prevention among adults: strategies for the use of pneumococcal vaccines. // The American Journal of Preventive Medicine. 2015. Vol. 49, N 4. P. 383-390.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Pilishvili T, Bennett NM. Pneumococcal disease prevention among adults: strategies for the use of pneumococcal vaccines. The American Journal of Preventive Medicine. 2015; 49(4):383-90. DOI: 10.1016/j.vaccine.2015.05.102</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit9"><label>9</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Pichichero ME, Khan MN, Xu Q. Next generation protein based Streptococcus pneumoniae vaccines. // Human Vaccines &amp; Immunotherapeutics. 2016. Vol. 12. N1. Р. 194-205.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Pichichero ME, Khan MN, Xu Q. Next generation protein based Streptococcus pneumoniae vaccines. Human Vaccines &amp; Immunotherapeutics. 2016; 12 (1): 194-205. DOI: 10.1080/21645515.2015.1052198.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit10"><label>10</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Pichichero ME. Pneumococcal whole-cell and protein -based vaccines: Changing the paradigm. Expert Review of Vaccines. 2017; Vol. 16. N12. Р. 1181-1190.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Pichichero ME. Pneumococcal whole-cell and protein -based vaccines: Changing the paradigm. Expert Review of Vaccines. 2017; 6 (12): 1181-90. DOI: 10.1080/14760584.2017.1393335.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit11"><label>11</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Darrieux M., Goulart C., Briles D., Leite LC. Current status and perspectives on protein-based pneumococcal vaccines. Critical Reviews in Microbiology. 2015. Vol. 41. N. 2. Р. 190-200.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Darrieux M, Goulart C, Briles D, Leite LC. Current status and perspectives on protein-based pneumococcal vaccines. Critical Reviews in Microbiology 2015; 41(2):190-200. DOI: 10.3109/1040841X.2013.813902.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit12"><label>12</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Principi N, Esposito S. Development of pneumococcal vaccines over the last 10 years. Expert Opinion on Biological Therapy. 2018. Vol. 18. N1. Р. 7-17.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Principi N, Esposito S. Development of pneumococcal vaccines over the last 10 years. Expert Opinion on Biological Therapy. 2018; 18 (1): 7-17. DOI: 10.1080/14712598.2018.1384462.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit13"><label>13</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Курбатова Е.А., Воробьёв Д.С., Егорова Н.Б. и др. Штаммовые различия внутривидовой иммуногенной активности антигенных компонентов Streptococcus pneumaniae. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2013. № 5. С. 60-69.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Kurbatova EA, Vorobiev DS, Egorova NB et al. Strain difference of intra-species immunogenic activity of Streptococcus pneumoniae antigen components. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. Moscow. 2013; 5: 60-9 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit14"><label>14</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Грищенко Н.В., Токарская М.М, Калина Н.Г. и др. Влияние состава питательной среды на продукцию капсульного полисахарида S. pneumoniae типа 19А. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2012. №2. С. 12-17.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Grischenko NV, Tokarskaya MM, Kalina NG, et al. Influence of nutrient medium composition on the production of capsule polysaccharide by Streptococcus pneumonia 19A serotype. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. Moscow. 2012; 2: 12-7 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit15"><label>15</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Перт С.Дж,. ред. Работнова И.Л. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.:Мир; 1978.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Pirt SJ. Principles of microbe and cell cultivation / S.J. Pirt // Ed. Professor I.L. Rabotnova. Moscow: Mir. 1978 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit16"><label>16</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Lowry OH., Rosebrough NJ., Farr AL., Randall RJ. Protein measurement with Folin phenol reagent. The Journal of Biological Chemistry. 1951. Vol. 193. N1. Р. 265-275.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with Folin phenol reagent. The Journal of Biological Chemistry.1951, 193 (1): 265-275.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit17"><label>17</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Юнкеров В.И., Григорьев С. Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. СПб. 2001.266 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Yunkerov VI, Grigoriev SG. Mathematical and statistical processing of medical research data. Saint Petersburg. 2001:266 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit18"><label>18</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Гланц С.А. Медико-биологическая статистика. М.: Издательство «Практика»; 1999.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Glantz SA. Primer of biostatistics. 4th ed. Moscow: Praktika; 1999 (In Russ.).</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
