Активация in vitro Тхелперов под влиянием антигенов Yersinia pestis у людей, вакцинированных против чумы

Актуальность. Поиск информативных маркеров для оценки иммунологической эффективности вакцины живой чумной (ВЧЖ) остается актуальной научной задачей.

Цель. Провести сравнительную оценку уровня активации Т-лимфоцитов хелперов привитых против чумы людей по маркерам CD69 и HLA-DR в тесте in vitro с использованием в качестве специфического стимулятора ультразвукового дезинтеграта клеток Y. pestis, выращенных при температуре 28оС (УЗДК).

Материалы и методы. Проведен цитофлуориметрический анализ образцов крови 45 лиц, привитых против чумы. Выявлена зависимость результата цитологического анализа по двум исследуемым клеточным маркерам от показателя иммунорегуляторного индекса у вакцинируемого донора на момент прививки.

Результаты. Установлено, что для впервые вакцинированных лиц характерна более интенсивная и длительная специфическая активация Т-хелперов по маркеру ранней активации, в то время как у ревакцинированных с иммунорегуляторным индексом на момент прививки выше 1,5 более интенсивная клеточная реакция была по маркеру поздней активации.

Выводы. Подтверждена возможность количественной оценки иммунологической эффективности вакцинации против чумы, основанной на выявлении маркеров активации лимфоцитов при стимуляции специфическим антигеном.

1. Silva M.T., Restana N.T. The in vivo life of facultative intracellular bacterial parasites: role in pathogenesis. Immunobiology 2013; 218(3):325–337. https://doi.org/10.1016/j.imbio.2012.05.0112.

2. Куличенко А. Н., Абзаева Н. В., Гостищева С. Е. и др. Использование антигенспецифических клеточных тестов in vitro для оценки формирования поствакцинального противочумного иммунитета. Инфекция и иммунитет. 2017; 7(2): 203–8. DOI: 10.15789/2220-7619-2017-2-203-208

3. Богачёва Н. В., Крючков А. В., Дармов И. В. и др. Экспериментальная оценка методом проточной цитофлуориметрии уровня клеточной иммунологической памяти у лиц, вакцинированных против чумы и сибирской язвы. Клин. лаб. Диагностика. 2013;11:48–53.

4. Бугоркова С. А., Щуковская Т. Н., Микшис Н. И. и др. Комплексное иммунологическое исследование вакцинированных живой чумной вакциной лиц, проживающих на территории Прикаспийского песчаного очага чумы в Республике Калмыкия. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2018;17(3):38–50. DOI: 10.31631/20733046-2018-17-3-38-505.

5. Дятлов И. И., Фирстова В. В., Бондаренко Н. Л. И др. Стратегия оценки поствакцинального иммунитета против чумы и туляремии. Аллергология и иммунология. 2016;17(2):112–4.

6. Вolton D., Roederer M. Flow cytometry and the future of vaccine development. Expert Rev. Vaccines. 2009;8(6):779–789.

7. Кравцов А. Л., Шмелькова Т. П., Клюева С. Н., Смолькова Е. А. Применение проточной цитометрии при разработке вакцин против особо опасных инфекций: современные достижения и перспективы. Эпидемиол. и Вакцинопрофил., 2011;4(59):53–60.

8. Дубровина В. И., Корытов К. М., Пятидесятникова А. Б. и др. Опыт применения комплексного антигенногопроба для оценки выраженности специфического противочумного ответа. Acta biomedica scientifica.2021;6(2):41–46. doi: 10.29413/ABS.2021-6.2.4

9. Firstova V.V., Tyurin E.A., Kravchenko T.B., et al. The in vitro evaluation of anti-plague cellular immunity by quantitative analysis of IFN-Ƴ synthesis and the appearance of activation molecules on the surface of T-helper cells. In: Almeida A.M.P. and Leal N.C., editors. Advances in Yersinia Research. Advances in Experimental Medicine and Biology 954. Springer Science + Business Media New York; 2012. P. 173–7. DOI 10.1007/978-1-4614-3561-7_22

10. Leal E.A., Moreira J.D., Nunes F.F., et al. Humoral and cellular immune response of mice challenged with Yersinia pestis antigenic preparations. Braz. J. Infec. Diseases. 2017;21(6):620–6. DOI: 10.1016/j.bjid.2017.09.001

11. Direct Immunofluorescence Staining of Whole Blood using a Lyse/No-Wash Procedure. BD Bioscience Resources and Tools. Доступно на: https://www.bdbioscience.com/en-us/resources/protocols/stain-lyse-no-wash.

12. Vera E.J., Chew Y.V., Nicholson L., et al. Standartization of flow cytometry for whole blood immunophenotyping of islet transplant and transplant clinical trail recipients. PLoS ONE.2019; 22;14(5):e0217163. https://doi.org/10.1371/journal pone.021716313.

13. Макарова В. Г., Устинова О. Ю., Долгих О. В., Загумённых А. Д. Иммунологический профиль и состояние поствакцинального иммунитета к инфекциям, управляемым средствами иммунопрофилактики у детей в условиях комбинированной аэрогенной экспозиции химическими веществами техногенного происхождения. Здоровье населения и среда обитания.2013;11(248):27–29.