Определение специфической активности дифтерийного анатоксина в комбинированных вакцинах методом кожно-некротических проб

Актуальность. В последние годы в Европейском союзе ведется политика, направленная на снижение использования животных в исследованиях, в т. ч. фармацевтических. В рамках данного подхода предлагаются альтернативные методы оценки иммуногенности, в частности, дифтерийного анатоксина, к примеру, метод кожно-некротических проб (intradermal challenge test). Специфическая активность дифтерийного анатоксина данным методом оценивается по его способности защищать иммунизированных животных от дермонекротического действия дифтерийного токсина.

Цель. Сравнение методов летального заражения и кожно-некротических проб для определения специфической активности дифтерийного анатоксина в комбинированных вакцинах и анатоксинах российского производства.

Материалы и методы. В работе использовались отечественные и зарубежные комбинированные вакцины и анатоксины для профилактики дифтерии, дифтерийные токсины, референс-препараты. Определение специфической активности дифтерийного анатоксина проводили на морских свинках фармакопейными методами: летального заражения и кожно-некротических проб.

Результаты. Для оценки специфической активности дифтерийного анатоксина использована методика, соответствующая рекомендациям ВОЗ, для этого были подобраны морские свинки, аналогичные по чувствительности к дифтерийному токсину свинкам Dunkin Hartley, и проведены сравнительные испытания методов кожно-некротических проб и летального заражения для определения специфической активности дифтерийного анатоксина.

Выводы. Результаты исследования продемонстрировали принципиальную возможность применения метода кожно-некротических проб для оценки специфической активности дифтерийного анатоксина. Однако по ряду факторов, таких как вариабельность результатов, количество животных и др., метод кожно-некротических проб уступает методу летального заражения при оценке специфической активности дифтерийного анатоксина в рутинной практике.

1. Manual for Quality Control of Diphtheria, Tetanus and PertussisVaccines, World Health Organization 2013. Ordering code: WHO/IVB/11.11.

2. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (Text with EEA relevance). Доступно на: https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex%3A32010L0063. Ссылка активна на 1 апреля 2022.

3. Assay of diphtheria vaccine (adsorbed), general chapter 2.7.6 version 01/2008:20706. Ph. Eur. 10th Edition. Strasbourg, France: Council of Europe; European Pharmacopoeia online, www.pheur.edqm.eu/home.

4. Sanofi [официальный сайт] Доступно на: https://www.sanofi.com/en/science-and-innovation/clinical-trials-and-results/responsible-use-of-animals-in-research-andproduction. Ссылка активна на 1 апреля 2022.

5. Sanofi [официальный сайт] Доступно на: https://www.sanofi.com/-/media/Project/One-Sanofi-Web/Websites/Global/Sanofi-COM/Home/common/docs/our-responsibility/documents-center/factsheets-2020/animal-protection.pdf?la=en. Ссылка активна на 1 апреля 2022.

6. Pfizer [официальный сайт] Доступно на: https://www.pfizer.com/science/animals-used-in-research. Ссылка активна на 1 апреля 2022.

7. GlaxoSmithKline[официальный сайт] Доступно на: https://us.gsk.com/en-us/research-and-development/our-use-of-animals/the-3rs-in-medicine-research/. Ссылка активна на 1 апреля 2022.

8. Akkermans A., Chapsal J., Coccia E., et al. Animal testing for vaccines. Implementing replacement, reduction and refinement: challenges and priorities. Biologicals. November 2020. Vol. 68, P. 92–107. https://doi.org/10.1016/j.biologicals.2020.07.010.

9. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (ETS 123). Strasbourg; 1986.

10. Protocol of amendment to the European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (ETS No. 170). Strasbourg; 1998.

11. Statistical analysis of results of biological, general chapter 5.3 version 01/2008:50300. Ph. Eur. 10th Edition. Strasbourg, France: Council of Europe; European Pharmacopoeia online, www.pheur.edqm.eu/home.

12. Общая фармакопейная статья 1.7.2.0003.15 Иммуногенность адсорбированного дифтерийного анатоксина. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. Т. 2; 2018.

13. Pharmeuropa Special Issue BIO 2000-2, February 2001 Diphtheria Toxoid (adsorbed) - 3rd I.S. and BRP Collaborative Study for the Establishment of Diphtheria Toxoid (Adsorbed) Third International Standard and European Pharmacopoeia Biological Reference Preparation Batch No. 3. Доступно на: https://www.edqm.eu/medias/fichiers/bsp022.pdf. Ссылка активна на 1 апреля 2022.