Preview

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика

Расширенный поиск

Разработка кандидатной субстанции рекомбинантного белка CRM197

https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-1-93-98

Полный текст:

Аннотация

Белок CRM197 является одним из нетоксичных вариантов дифтерийного токсина, характеризующийся единичной мутацией, а именно, заменой глицина на глутаминовую кислоту в положении 52. Белок CRM197 является перспективным адъювантом нового поколения, который может быть успешно использован в вакцинных и терапевтических препаратах. Классическим способом получения дифтерийного токсина и его нетоксичных вариантов является продукция в клетках Corynebacterium diphtheria. Преимущество использования E.coli в качестве продуцента заключается в том, что данный метод является более простым и дешевым, и позволяет получать рекомбинантный CRM197 в короткие сроки с использованием непатогенного микроорганизма. В ходе исследования разработан состав кандидатной субстанции CRM197 на основе анализа физико-химических свойств белка, а также специфики его применения в составе конъюгированных вакцин. В субстанции рекомбинантного белка CRM197 присутствуют примеси белка штамма-продуцента - 0,054 нг/мкг белка CRM197, ДНК штамма-продуцента 1,26 пг/мкг белка CRM197, а также остаточные эндотоксины менее 0,078 EU на 1 мг белка. Таким образом, белок CRM197, являющийся нетоксичным вариантом дифтерийного токсина, представляет собой перспективный адъювант нового поколения, который может быть успешно использован в вакцинных и терапевтических препаратах. Использование трехступенчатой очистки позволило получить рекомбинантный белок CRM197 фармацевтически приемлемого качества. Данный метод имеет перспективы по внедрению в производственную практику.

Об авторах

Е. Г. Богомолова
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


О. А. Добровольская
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


А. А. Мировская
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


Р. И. Аль-Шехадат
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


Е. А. Федорова
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


И. В. Духовлинов
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


А. С. Симбирцев
ФГУП «Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов» ФМБА
Россия


Список литературы

1. Blanchard-Rohner G. The B-cell response to a primary and booster course of MenACWY-CRM197 vaccine administered at 2, 4 and 12 months of age. Vaccine. 2013; 31 (20): 2441 - 2448.

2. Malito E. Structural basis for lack of toxicity of the diphtheria toxin mutant CRM197. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2012; 109 (14): 5229 - 5234.

3. Pollard A.J. Maintaining protection against invasive bacteria with protein-polysaccharide conjugate vaccines. Nat. Rev. Immunol. 2009; 9 (3): 213 - 220.

4. Shinefield H.R. Postlicensure surveillance for Haemophilus influenzae type b invasive disease after use of Haemophilus influenzae type b oligosaccharide CRM197 conjugate vaccine in a large defined United States population: a four-year eight-month follow-up. Pediatr. Infect. Dis. J. 1995; 14 (11): 978 - 981.

5. Black S. Efficacy, safety and immunogenicity of heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in children. Northern California Kaiser Permanente Vaccine Study Center Group. Pediatr. Infect. Dis. J. 2000; 19 (3): 187 - 195.

6. Shinefield H.R. Overview of the development and current use of CRM(197) conjugate vaccines for pediatric use. Vaccine. 2010; 28 (27): 4335 - 4339.

7. Zhou J. Secretory expression of recombinant diphtheria toxin mutants in B. Subtilis. J. Tongji Med. Univ. Tong Ji Yi Ke Xue Xue Bao. 1999; 19 (4): 253 - 256.

8. Retallack D.M. Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system. Protein Expr. Purif. 2012; 81 ( 2): 157 - 165.

9. Духовлинов И.В., Федорова Е.А., Богомолова Е.Г., Добровольская О.А., Черняева Е.Н., Аль-Шехадат РИ., Симбирцев А.С. Получение рекомбинантного белка CRM197 в клетках E. coli. Инфекция и иммунитет. 2015; 5 (1): 37 - 44.

10. Mulkemn M. G., Wetzel R. pH dependence of the reversible and irreversible thermal denaturation of interferons. Biochemistry. 1989; 28: 6556 - 6561.


Для цитирования:


Богомолова Е.Г., Добровольская О.А., Мировская А.А., Аль-Шехадат Р.И., Федорова Е.А., Духовлинов И.В., Симбирцев А.С. Разработка кандидатной субстанции рекомбинантного белка CRM197. Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2016;15(1):93-98. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-1-93-98

For citation:


Bogomolova E.G., Dobrovol'skaya O.A., Mirovskaya A.A., Al-Shehadat R.I., Fedorova E.A., Dukhovlinov I.V., Simbirtsev A.S. . Epidemiology and Vaccinal Prevention. 2016;15(1):93-98. (In Russ.) https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-1-93-98

Просмотров: 77


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2073-3046 (Print)
ISSN 2619-0494 (Online)