Preview

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика

Расширенный поиск

Разработка иммуноферментной тест-системы для количественного определения IgG антител к вирусу Varizella zoster в сыворотке крови человека и оценка ее диагностической эффективности

https://doi.org/10.31631/2073-3046-2021-20-6-72-80

Полный текст:

Аннотация

Актуальность. Внедрение вакцинопрофилактики ветряной оспы диктует необходимость развития методологии контроля эффективности вакцинации и напряженности популяционного иммунитета. Эту проблему можно решить с помощью методов иммуноанализа с количественным учетом результатов. Цель работы. Разработка иммуноферментной тест-системы для определения концентрации иммуноглобулинов класса G (АТ) к вирусу Варицелла зостер (ВВЗ) и оценка ее технико-аналитических характеристик и диагностической эффективности. Материалы и методы. Рекомбинантный антиген GE ВВЗ. Международный стандарт ВОЗ антител к ВВЗ W1044. Образцы сывороток крови здоровых и больных ветряной оспой и опоясывающим лишаем людей, образцы сывороток крови, содержащие IgG к вирусам простого герпеса первого и второго типов, цитомегаловирусу, вирусу Эпштейна-Барр. Набор реагентов «Anti-VZV ELISA (IgG)» (Euroimmun, Германия). Метод непрямого твердофазного иммуноферментного анализа. Иммунизация животных рекомбинантным антигеном GE, выделение и очистка специфических антител. Получение конъюгатов моноклональных антител к IgG человека с антителами к антигену GE и с пероксидазой хрена. Результаты. Разработана иммуноферментная тест-система для определения концентрации IgG к ВВЗ (МЕ/мл) в сыворотке/плазме крови человека в «непрямом» формате. Получен и стандартизован по Международному ВОЗ-стандарту W1044 искусственный калибратор для определения концентрации АТ-ВВЗ. Определены основные функциональные характеристики разработанной иммуноферментной тест-системы в соответствии с требованиями ГОСТ 51352-2013. Тест-система испытана на образцах сывороток крови детей больных ветряной оспой (n = 43), взрослых с опоясывающим лишаем (n = 158), здоровых лиц (n = 781). По данным ROC-анализа, диагностическая чувствительность тест-системы составляет 85%, диагностическая специфичность – 87%. Показано отсутствие кросс-реактивности тест-системы на образцах с серологическими маркерами других герпесвирусных инфекций (n = 94). Сравнительные испытания разработанной тест-системы и ее коммерческого аналога – набора реагентов «Anti-VZV ELISA (IgG)» – не выявили статистически достоверных различий между их функциональными характеристиками. Выводы. Разработанная тест-система для определения концентрации АТ-ВВЗ в сыворотке/плазме крови человека по функциональным характеристикам соответствует требованиям ГОСТ 51352-2013, характеризуется высокой диагностической эффективностью, может быть использована для контроля вакцинопрофилактики и напряженности популяционного иммунитета, а также для оценки иммунного ответа при ветряной оспе и опоясывающем лишае.

Об авторах

Л. Н. Лухверчик
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Людмила Николаевна Лухверчик – к. м. н., ведущий научный сотрудник

105064, Москва, Малый Казенный переулок, д.5а.
Тел. +7  (495) 917-49-00



Г. И. Алаторцева
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Галина Ивановна Алаторцева – заведующая лабораторией

Москва
Тел. +7 (916) 230-78-70



Л. Н. Нестеренко
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Любовь Николаевна Нестеренко  – ведущий научный сотрудник

Москва
Тел. +7 (916) 377-86-72



В. Ю. Кабаргина
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Вера Юрьевна Кабаргина – научный сотрудник

Москва
Тел. +7 (916) 847-17-79



В. В. Доценко
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Вера Васильевна Доценко – старший научный сотрудник

Москва
Тел. +7 (903) 551-46-33



И. И. Амиантова
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Ирина Ильинична Амиантова – научный сотрудник

Москва
Тел. +7 (926) 203-20-12



О. Б. Выливанная
ГБУЗ города Москвы «Диагностический центр (Центр лабораторных исследований) Департамента Здравоохранения города Москвы»
Россия

Ольга Борисовна Выливанная – врач

Москва
Тел. +7  (967) 131-39-93



А. В. Сидоров
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Александр Викторович Сидоров  – заведующий лабораторией

Москва
Тел. +7 (916) 621-05-14



А. В. Милованова
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Александра Владимировна Милованова – научный сотрудник

Москва
Тел. +7  (929) 510-15-86



А. С. Оксанич
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Алексей Сергеевич Оксанич – старший научный сотрудник

Москва
Тел. +7 (916) 783-71-89



С. Ю. Кананыхина
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Светлана Юрьевна Кананыхина – заведующая консультативно-диагностическим центром

Москва
Тел. +7 (926) 221-47-39



В. В. Зверев
ФГБНУ НИИВС имени И. И. Мечникова
Россия

Виталий Васильевич Зверев  – научный руководитель института

Москва
Тел. +7 (985) 776-05-79



Список литературы

1. Учайкин В. Ф., Нисевич Н. И., Шамшева О. В. Инфекционные болезни у детей: учебник. М.: Гэотар-Медиа; 2011.

2. Государственный доклад «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2019 году». Доступно на: https://www.rospotrebnadzor.ru/upload/iblock/8e4/gosdoklad-za-019_seb_29_05.pdf. Ссылка активна на 16 июня 2021.

3. Нагиева Ф. Г., Баркова Е. П., Строева А. Д. и др. Характеристика маркеров холодовой адаптации кандидатных вакцинных штаммов для живых аттенуированных вакцин против ветряной оспы и опоясывающего герпеса // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2020. Т.97, №4. С.303–311. doi: https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-4-2

4. За 2020 год было выявлено более полумиллиона новых случаев ветряной оспы. Доступно на: https://www.antibiotics-chemotherapy.ru/jour/announcement/view/506#. Ссылка активна на 16 июня 2021.

5. Vizoso Pinto M.G., Pfrepper K.-I., Janke T., et al. A systematic approach for the identification of novel, serologically reactive recombinant Varicella zoster Virus (VZV) antigens // Virol J. 2010. N.7. P.165–173. doi:10.1186/1743-422X-7-165

6. Park R., Hwang J.Y., Lee K.I., at al. Measurement of antibodies to Varicella zoster virus using a virus-free fluorescent-antibody-to-membrane-antigen (FAMA) test // Microbiol Biotechnol. 2015. Vol. 25, N.2. P.268–273. doi:10.4014/jmb.1408.08048

7. Алаторцева Г. И., Сидоров А. В., Нестеренко Л. Н. и др. Получение рекомбинантного аналога гликопротеина е вируса Varicella zoster: клонирование, экспрессия и исследование антигенных свойств // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2016. Т.15, №1. С.77–85.

8. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation // J Histochem Cytochem. 1974. Vol. 22, N.12. P.1084–1091. doi:10.1177/22.12.1084

9. Staros J.V., Wright R.W., Swingle D.M. Enhancement by N-hydroxysulfosuccinimide of water-soluble carbodiimide-mediated coupling reactions // Anal Biochem. 1986. Vol. 156, N.1. P.220–222. doi:10.1016/0003-2697(86)90176-4

10. Baiker A., Haase R., Eberle J., et al. Early detection of Varicella zoster virus (VZV)-specific T-cells before seroconversion in primary Varicella infection: case report // Virol J. 2010. Vol. 7, N.1. P.54–56. doi:10.1186/1743-422X-7-54

11. Hasan U.A., Harper D.R., Wren B.W., et al. Immunization with a DNA vaccine expressing a truncated form of Varicella zoster virus glycoprotein E // Vaccine. 2002. Vol. 31, N.20. P.1308–1315. doi:10.1016/s0264-410x(01)00475-3

12. Канев А. Н., Воробьева М. С., Шалунова Н. В. и др. Разработка стандартных панелей сывороток для контроля качества иммуноферментных тест-систем в России // Вестник Российской Академии медицинских наук. 1998. №3. С.47–51.

13. ГОСТ Р 51352-2013 «Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний». Доступно на: https://docs.cntd.ru/document/1200108445. Ссылка активна на 16 июня 2021

14. Юнкеров В. И., Григорьев С. Г., Резванцев М. В. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. 3-е изд., доп. СПб.:ВМедА;2011.

15. Hosmer D.W., Lemeshow S. Applied Logistic Regression. 2nd ed. Wiley (NY); 2000.

16. Григорьев С. Г., Лобзин Ю. В., Скрипченко Н. В. Роль и место логистической регрессии и ROC-анализа в решении медицинских диагностических задач // Журнал инфектологии. 2016. Т.8, №4. С.36–45. doi.org/10.22625/2072-6732-2016-8-4-36-45

17. de Orya F., Echevarria J. M., Kafatos G., et al. European seroepidemiology network 2: Standardisation of assays for seroepidemiology of Varicella zoster virus // J Clin Virol. 2006. Vol. 36, N. 2. P. 111–118. doi:10.1016/j.jcv.2006.01.017

18. Соломай Т. В., Семененко Т. А., Каражас Н. В. и др. Особенности изменения показателей иммунного статуса лиц с активными и латентными формами герпесвирусных инфекций // Пермский медицинский журнал. 2021; Т.38, №1. С. 46–63. doi:10.17816/pmj38146%63


Рецензия

Для цитирования:


Лухверчик Л.Н., Алаторцева Г.И., Нестеренко Л.Н., Кабаргина В.Ю., Доценко В.В., Амиантова И.И., Выливанная О.Б., Сидоров А.В., Милованова А.В., Оксанич А.С., Кананыхина С.Ю., Зверев В.В. Разработка иммуноферментной тест-системы для количественного определения IgG антител к вирусу Varizella zoster в сыворотке крови человека и оценка ее диагностической эффективности. Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2021;20(6):72-80. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2021-20-6-72-80

For citation:


Lukhverchyk L.N., Alatortseva G.L., Nesterenko L.N., Kabargina V.Y., Dotsenko V.V., Amiantova I.I., Vylivannaya O.B., Sidorov A.V., Milovanova A.V., Oksanich O.S., Konanykhina S.Y., Zverev V.V. Development of the ELISA Test System for Quantitative Determination of IgG to the Varizella zoster virus in Human Serum and Assessment of its Diagnostic Efficiency. Epidemiology and Vaccinal Prevention. 2021;20(6):72-80. (In Russ.) https://doi.org/10.31631/2073-3046-2021-20-6-72-80

Просмотров: 91


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2073-3046 (Print)
ISSN 2619-0494 (Online)